电泳缓冲液、染料和凝胶加样液的配置

  • A+
所属分类:蛋白质组学

电泳缓冲液

50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液

成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量
2mol/L Tris碱
1mol/L 乙酸
100 mmol/L EDTA
水 242g
57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)
200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
补足1L

5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液

成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量
445 mmol/L Tris碱
445 mmol/L 硼酸盐
10 mmol/L EDTA
水 54g
27.5g 硼酸
20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
补足1L

染料

1%溴酚蓝(bromophenol blue)
加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)
溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。
10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide)
小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。
凝胶上样液(gel loading solutions)
6×碱性凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.3 N 氢氧化钠
6 mmol/L EDTA
18%聚蔗糖(400型)
0.15%溴甲酚绿
0.25%二甲苯青FF
水 300ul 10N 氢氧化钠
120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
1.8g
15mg
25mg
补足到10ml

6×聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚蓝
0.15%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA
15%聚蔗糖(400型)
水 1.5ml 1%溴酚蓝
1.5ml 1%二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
1.5g
补足到10ml

6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.25%溴酚蓝
0.25%二甲苯青FF
15%聚蔗糖(400型)
水 2.5ml 1%溴酚蓝
2.5ml 1%二甲苯青FF
1.5g
补足到10ml

6×甘油凝胶上样液(4℃贮存)

成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚蓝
0.15%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA
50%甘油
水 1.5ml 1%溴酚蓝
1.5ml 1%二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
3ml
3.9ml

6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚蓝
0.15%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA
40%聚蔗糖
水 1.5ml 1%溴酚蓝
1.5ml 1%二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
4g
补足到10ml

10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.2%溴酚蓝
0.2%二甲苯青FF
200 mmol/L EDTA
0.1%SDS
50%甘油
水 20mg
20mg
4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
100ul 10% SDS
5ml
补足到10ml

  • 蛋白质组学业务咨询
  • 扫码咨询相关问题
  • weinxin
  • 代谢组学业务咨询
  • 扫码咨询相关问题
  • weinxin

发表评论

:?: :razz: :sad: :evil: :!: :smile: :oops: :grin: :eek: :shock: :???: :cool: :lol: :mad: :twisted: :roll: :wink: :idea: :arrow: :neutral: :cry: :mrgreen: