EMSA核心实验技术:实验原理

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所属分类:蛋白质组学
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凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA 结合 蛋白 和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用、DNA定性和定量分析 。生物素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。

如上图所示,DNA-复合物比非结合的探针移动得慢;当检测DNA结合蛋白,可用纯化蛋白、部分纯化蛋白或核细胞 抽提液;竞争实验中采用含蛋白结合序列的dna片段 和寡核苷酸片段(特异)和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA结合蛋白的特异性;在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。

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