食品中总氮的测定

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所属分类:蛋白质测序

(二)原理

有机物中的氮在强热和浓H 2 SO 4 作用下,生成(NH 42 SO 4 ,在凯氏定氮器中与碱作用,通过蒸馏释放出氨,用硼酸将氨吸收后以盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,计算蛋白质含量。

(三)仪器与试剂

1. 定氮蒸馏装置(如图3-1),微量滴定管。

2.硫酸铜,硫酸钾,硫酸。

3.2%硼酸溶液 称取20g硼酸溶解在少量蒸馏水中,再稀释至1000ml。

4. 混合指示剂 1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。

5.40%氢氧化钠溶液 40g氢氧化钠溶解于蒸馏水中,再稀释至100ml。

6.0.05mol/L盐酸标准溶液

(四)操作步骤

1.样品处理 精密称取0.2~2.0g固体样品或2~5g半固体样品或吸取10~20ml液体样品(约相当氮30~40mg),移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中,加人0.2g硫酸铜、3g硫酸钾及20ml硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。

小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热0.5h。取下放冷,小心加20ml水。放冷,移人100ml容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容置瓶中,再加水至刻度,混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。

2.按图⒊1装好定氮装量,于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处,加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸,用调压器控制,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。

3.向接收瓶内加入10m1 2%硼酸溶液及混合指示液1滴,并使冷凝管的下端插人液面下,吸取10.0ml样品消化稀释液由小玻杯流入反应室,以10ml水洗涤小玻杯并使其流入反应室内,塞紧小玻杯的棒状玻塞。

将10m1 40%氢氧化钠溶液倒人小玻杯,提起玻塞使其缓缓流人反应室,立即将玻塞盖紧,并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹,开始蒸馏。蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,蒸馏5min。

移动接收瓶,使冷凝管下端离开液面,再蒸馏1min,然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶,以0.05mol/L盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。

同时吸取10.0ml试剂空白消化液按3操作。
食品中总氮的测定

4.结果计算

食品中总氮的测定

蛋白质中的氮含量一般为15%~17.6%,按16%计算乘以6.25即为蛋白质含量,乳制品的蛋白质换算系数为6.38,面粉为5.70,玉米、高粱为6.24,花生为5.46,米为5.95,大豆及其制品为5.71,肉与肉制品为6.25,大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83,芝麻、向日葵为5.30。

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