血浆游离血红蛋白测定

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所属分类:蛋白质测序

实验原理

血红蛋白具有类过氧化物酶活性,可催化H2O2释放新生态氧,使邻甲联苯胺氧化发生颜色变化,由无色最终变为蓝紫色。根据显色深浅与标准进行比较,可测出其含量。

实验方法

材料:

1.2g/L邻甲联苯胺溶液

2.1%H2O2

3.10%醋酸溶液

4.分光光度计

方法:

1.抽取静脉血2-3ml,枸橼酸钠抗凝,离心分离血浆。

2.按下表进行操作,用分光光度计,波长为530nm,以空白管调零,测定测定管的吸光度。

试剂 (ml) 测定管 空白管 2 g/L邻甲联苯胺溶液 0.5 0.5 患者血浆 0.02 / 1% H2O2 0.5 0.5 混匀后室温放置10min 10%醋酸溶液 5.0 5.0 室温放置10min

3.计算公式

血浆游离Hb(mg/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×100 实验结果计算

参考范围:0-40mg/L

注意事项

1.一切容器避免血红蛋白污染; 2.采血要顺利,器皿要干燥,检测血浆要新鲜,及时分离,防止人为溶血; 3.邻联苯胺溶液具致癌性,检测时要小心,废液要妥善处理,以免污染; 4.双氧水要新鲜配置,浓度要准确。

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