蛋白质的透析

  • A+
所属分类:蛋白质测序

一、目的

学习透析的基本原理和操作。

二、原理

蛋白质是大分子物质,它不能透过透析膜而小分子物质可以自由透过。在分离提纯蛋白质的过程中,常利用透析的方法使蛋白质与其中夹杂的小分子物质分开。

三、器材
1、透析管或玻璃纸2、烧杯
3、玻璃棒4、电磁搅拌器

5、试管及试管架

四、试剂
1、蛋白质的氯化钠溶液3 个除去卵黄的鸡卵蛋清与700mL 水及300mL 饱和氯化钠溶液混合后,用数层干纱布过滤。
2、10%硝酸溶液
3、1%硝酸银溶液
4、10%氢氧化钠溶液

5、1%硫酸铜溶液

五、操作
1、用蛋白质溶液作双缩脲反应。
2、向火棉胶制成的透析管中装人10~15mL 蛋白质溶液并放在盛有蒸馏水的烧杯中(或用玻璃纸装入蛋白质溶液后扎成袋形,系于一横放在烧杯的玻璃棒上)。
3、约1 小时后,自烧杯中取水1~2mL,加10%硝酸溶液数滴使成酸性,再加入1%硝酸银溶液1~2 滴,检查氯离子的存在。
4、从烧杯中另取1~2mL 水,做双缩脲反应,检查是否有蛋白质存在。
5、不断更换烧杯中的蒸馏水(并用电磁 搅拌器 不断搅动 蒸馏 水)以加速透析过程。数小时后从 烧杯 中的水中不能再检出氯离子。此时停止透析并检查 透析袋 内容物是否有蛋白质或氯离子存在(此时应观察到 透析袋 中球蛋白沉淀的出现,这是因为球蛋白不溶于纯水的缘故)。

  • 蛋白质组学业务咨询
  • 扫码咨询相关问题
  • weinxin
  • 代谢组学业务咨询
  • 扫码咨询相关问题
  • weinxin

发表评论

:?: :razz: :sad: :evil: :!: :smile: :oops: :grin: :eek: :shock: :???: :cool: :lol: :mad: :twisted: :roll: :wink: :idea: :arrow: :neutral: :cry: :mrgreen: